定点突变提高枯草芽孢杆菌L-天冬酰胺酶的活力及稳定性

摘要：

L-天冬酰胺酶可以催化L-天冬酰胺转化为L-天冬氨酸和氨.它可以通过降解食品原料中的L-天冬酰胺而降低高温烹制食品中丙烯酰胺的含量.由于食品预处理环境的复杂性,只有具有高酶活且稳定的酶才能满足食品生产中的应用.作者通过点突变提高来源于Bacillus subtilis B11-06的L-天冬酰胺酶(BsAⅡ)的酶活和热稳定性.通过序列比对和同源模拟选择5个点进行突变,构建6个突变菌株.酶活测定结果表明,突变体酶S299Nansz和P348Aansz的酶活较BsAⅡ分别提高28％和32％.其中P348Aansz的热稳定性和pH稳定性较BsAⅡ均有明显提高.本研究表明,第299和348位氨基酸残基对酶的催化作用有较大影响,对该酶的催化机理的研究提供了一定的基础,并提高了该酶的工业应用潜力.

关键词：L-天冬酰胺酶、定点突变、热稳定性、pH稳定性

所属期刊栏目：34

分类号：Q789(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金项目31500065;国家863计划项目SS2015AA021004;中国博士后科学基金资助项目2015M570407;中央高校基本科研业务费专项资金项目JUSRP11545;工业生物技术教育部重点实验室开放课题KLIB-KF201406

在线出版日期：2016-03-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1128-1134