微板核酸杂交检测芽孢杆菌属的方法建立

摘要：

以白酒发酵过程中的优势菌枯草芽孢杆菌为模式菌株，针对具有高保守性及特异性的16S rRNA设计一组核酸探针，建立了对芽孢杆菌属进行定性和定量分析的新型的微板核酸杂交检测方法，优化了关键检测条件。结果表明，当S1酶反应温度为42℃时，芽孢杆菌属检测探针能分开目标序列仅差一个碱基的近缘属。当捕获探针和信号探针工作浓度均为5 nmol/L，与分析探针杂交温度都为50℃，杂交时间分别为60 min和15 min时，检测信号的强弱与细菌数呈良好的线性关系，能实现定量检测，灵敏度高达1.33×102 cells/mL。本方法提供了一个快速定性定量的检测技术，具有很好的应用于白酒发酵过程中芽孢杆菌属实时监测的潜力。

关键词：微板核酸杂交技术、芽孢杆菌属、16S rRNA、定性、定量

分类号：Q815(生物工程学(生物技术))

资助基金：国家863计划项目2012AA021302。

在线出版日期：2015-04-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：175-182