嗜热内切-1,4-β-木聚糖酶在枯草杆菌中的表达及酶学性质

摘要：

首先根据Thermopolyspora flexuosa的内切-1,4-β-木聚糖酶基因设计了引物,PCR扩增成功后进行酶切消化,连接载体质粒pHT43,经大肠杆菌DH5α扩增后,挑选阳性克隆,经菌体PCR及测序验证后,将基因序列测序正确的质粒大量抽提,经过转化导入枯草芽孢杆菌Bacillus subtilius WB800N宿主,培养并经过1 mmol/L IPTG诱导表达后,发酵胞外上清经SDS-PAGE电泳证明重组蛋白质成功获得表达.其相对分子质量为27 kD,最适反应温度为80℃,最适反应pH为6.0.由此得知,分泌表达的嗜热内切-1,4-β-木聚糖酶的枯草芽孢杆菌工程菌株构建成功,这为未来该酶的产业化生产奠定了基础.

关键词：枯草芽孢杆菌表达系统、分泌表达、耐高温嗜热内切-1、4-β-木聚糖酶

所属期刊栏目：32

分类号：Q814;Q789(生物工程学(生物技术))

资助基金：天津市滨海新区科技小巨人成长计划-科技型企业创新发展科技创业项目2010-BK130070;天津市科技型中小企业技术创新基金项目11C26211203970;天津市滨海新区重大科技项目2011-BK120014;天津市科技计划项目12ZCZDSY01800

在线出版日期：2014-02-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1333-1337