Clostridium paraputrificum M-21β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶的表达、纯化与性质

摘要：

以Clostridium paraputrificum M21染色体DNA为模板,经PCR扩增获得编码β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶的基因nag3A,与质粒pQE30T所构建的表达质粒pNAG3A在Escherichia coli M15中表达良好.从重组E.coli M15中纯化得到的Nag3A以4-MU-GlcNAc为底物时,最适作用温度和最适作用pH分别为50 ℃和7.0;在30 ℃以下和pH 6～9之间该酶活性稳定.对4-MU-GlcNAc的Km和Vmax分别为7.9 μmol和21.8 μmol/(min*mg).Nag3A可以水解几丁寡糖和几丁质,作用方式是从非还原端逐一水解β-1,4-D-N-乙酰氨基葡萄糖苷键,产生N-乙酰氨基葡萄糖,对几丁二糖具有较高的水解活性.

关键词：β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶、类腐败梭菌、大肠杆菌、纯化、稳定性

所属期刊栏目：22

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：日本文部科学省大学校科研和教改项目12794004

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：41-45,52