德尔卑沙门氏菌分子等温活菌检测体系的建立

摘要：

[背景]德尔卑沙门氏菌(Salmonella enterica subsp.enterica Derby)是危害人类生命安全的主要致病性血清型.[目的]建立一种准确、快速检测德尔卑沙门氏菌的方法.[方法]通过建立叠氮溴化丙锭(propidium monoazide,PMA)-重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase amplification,RPA)的方法准确有效地检测样品中的活德尔卑沙门氏菌.[结果]使用基因RU61_00441作为检测靶点,设计引物SD1正确地鉴定了所有被测菌株.实验结果表明,PMA处理能有效区分活细胞和死细胞.基因组DNA检测限为761.2 fg/μL,活菌检测限为45 CFU/mL.此方法检测德尔卑沙门氏菌的血清型不受自然背景(猪肉、鸡肉和牛肉)菌群基因组DNA的影响.此外,该方法还可以检测出动物性食品中富集6 h后浓度低至3.9 CFU/mL的德尔卑沙门氏菌.[结论]这种PMA-RPA检测方法耗时短并具有更好的灵敏度和特异性,能为沙门氏菌的检测提供更有效的指导.

关键词：德尔卑沙门氏菌、重组酶聚合酶扩增、叠氮溴化丙锭、特异性基因

所属期刊栏目：49

分类号：TS201.6;S859.84;R345.57

资助基金：安徽高校自然科学研究项目;安徽省自然科学基金

在线出版日期：2022-04-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：1214-1223