副溶血性弧菌CalR调控vopB2的分子机制

摘要：

[背景]副溶血性弧菌是一种非常重要的食源性致病菌,CalR蛋白是一种全局转录调节因子.Ⅲ型分泌系统2(Type 3 secretion systems 2 T3SS2)是副溶血性弧菌主要的毒力因子,vopB2是T3SS2中的一个关键效应蛋白.[目的]研究副溶血弧菌CalR对vopB2的转录调控机制.[方法]利用引物延伸实验鉴定vopB2及vtrA的转录起始位点,并根据产物的丰度判断CalR对靶基因的调控关系;采用实时定量RT-PCR研究靶基因mRNA在WT和△calR中转录丰度,验证CalR对靶基因的转录调控关系,进一步利用LacZ实验通过比较β-半乳糖苷酶活性的差异来判定CalR对靶基因的调控关系;利用凝胶阻滞实验分析His-CalR对靶基因启动子区是否具有直接的结合作用.[结果]vopB2有两个转录起始位点A(-130和-28)且其活性受CalR的直接抑制;引物延伸和LacZ结果表明CalR对vtrA的转录并无调控作用.[结论]CalR直接抑制vopB2的转录,该抑制作用与vtrA无关联.

关键词：副溶血弧菌、转录调控、CalR、vopB2、vtrA

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资助基金：国家自然科学基金青年项目81501779;河南省高等学校重点科研项目18A320024;江苏省自然科学基金青年基金BK20160505

在线出版日期：2019-10-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1672-1677