LncRNA-GAS5对BCG感染小鼠巨噬细胞后细胞坏死的调控作用

摘要：

[背景]LncRNA-GAS5是由Gas5基因编码的功能性LncRNA分子,对细胞极化、细胞凋亡、坏死和自噬等多种生物学过程具有重要的调控作用.[目的]探讨LncRNA-GAS5对卡介苗(Bacillus Calmette-Guérin,BCG)诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7坏死的调控作用.[方法]构建LncRNA-GAS5的过表达及干扰载体,分别转染巨噬细胞RAW264.7后使用BCG感染,采用噻唑蓝比色法(MTT)检测细胞存活率,通过透射电镜观察细胞坏死形态,利用碘化丙啶(Propidine iodide,PI)单染法流式细胞仪检测细胞坏死率,通过实时荧光定量PCR和Western blot法研究坏死相关调控因子RIP1、RIP3和MLKL的表达水平.[结果]BCG感染巨噬细胞后,LncRNA-GAS5表达水平显著上调;同时,采用LncRNA-GAS5过表达载体单独转染或结合BCG感染后,巨噬细胞存活率均下降且细胞坏死率显著增加.同时坏死关键调控因子RIP1、RIP3和MLKL的mRNA及蛋白表达水平均显著上调(P<0.001),而GAS5干扰载体可有效抑制这一效果.[结论]LncRNA-GAS5通过上调坏死相关因子RIP1、RIP3及MLKL的表达促进BCG感染巨噬细胞后诱导的细胞坏死,研究结果为进一步探讨LncRNA-GAS5对BCG感染巨噬细胞后细胞坏死调控的分子机制奠定了基础.

关键词：LncRNA-GAS5、RAW264.7细胞、卡介苗、细胞坏死

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资助基金：国家自然科学基金31560322,31760324,31760326;西部一流学科建设重大创新项目ZKZD2017001;宁夏科技创新领军人才培养项目KJT2017002;宁夏大学研究生创新项目GIP2018043

在线出版日期：2019-06-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共11页

页码：858-868