稻瘟菌CYP51蛋白F螺旋区保守氨基酸残基与烯唑醇作用机制研究

摘要：

[目的]研究稻瘟菌CYP51蛋白F螺旋区保守氨基酸残基与烯唑醇的相互作用机制,为稻瘟病菌新型高效特异杀菌剂的开发提供理论依据.[方法]设计稻瘟菌CYP51蛋白F螺旋区保守氨基酸残基突变体P222C、P222H、I223A、I223W、N224A、N224S,截去N端跨膜区36个氨基酸后,在大肠杆菌BL21 (DE3) Rosetta菌株中过量表达,采用结合光谱法分析诱导蛋白对烯唑醇的结合能力.[结果]表达的目标蛋白均保持了对药物的结合能力,呈现出Ⅱ型的结合光谱曲线.相对于野生型蛋白,突变体I223W和I223A对烯唑醇的结合常数Kd值基本不变,N224S、N224A、P222C的Kd值都略有增大,无显著性差异(P＞0.05),但是,P222H的Kd值有了显著的增大(P＜0.05),表明突变体P222H对烯唑醇的亲和能力显著降低. [结论]稻瘟菌CYP51 P222位点的疏水性与药物结合密切相关.

关键词：稻瘟菌、烯唑醇、CYP51、突变、结合光谱

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资助基金：国家自然科学基金项目No.30900054,21172089;国家水体污染控制与治理科技重大专项项目No.2013ZX07104-004-03;华中师范大学中央高校基本科研业务费项目No.CCNU14A02011

在线出版日期：2016-04-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：2433-2439