兽疫链球菌中与透明质酸合成相关新基因的高通量筛选及克隆

刘浩毕亚丽王璐王震

天津科技大学;

摘要：

[目的]兽疫链球菌(Streptococcus equi subsp.zooepidemicus)中透明质酸主要的生物合成途径和相关基因已经被研究得比较透彻,探究一种挖掘与透明质酸合成相关新基因的策略.[方法]利用自杀质粒pSET4s::sacB在宿主基因组中的随机整合作用,筛选具有表型差异突变菌株构建突变体库,进一步利用连接介导PCR (Ligation mediated PCR,LM-PCR)方法和全基因组重测序,检测质粒整合位点,通过基因无痕敲除和回补实验验证插入位点.[结果]构建了包含150株具有表型差异突变株的突变体库;以荚膜合成能力缺失的1号突变株(M1)作为基础研究对象,检测到自杀质粒整…展开v

关键词：透明质酸、兽疫链球菌、突变体库、整合位点、基因敲除

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资助基金：科技部国际合作项目No.2011DFA31280;天津市国际科技合作项目No.13RCGFSY19400

在线出版日期：2016-04-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：2291-2299