ADH7启动子精细调控表达MSN2酿酒酵母菌株对糠醛耐受的研究

摘要：

[目的]构建自我精细调控表达应激转录调控基因MSN2的酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)基因工程菌株,提高其对糠醛的耐受能力.[方法]以酿酒酵母BY4742基因组DNA为模板,采用PCR技术扩增获得ADH7启动子、CYC1终止子以及MSN2编码框序列,以pUG6质粒为载体构建含ADH7p-MSN2-CYC1t表达盒的重组表达质粒pUG6-AM.通过醋酸锂法,将线性化后的质粒pUG6-AM转入酿酒酵母BY4742,筛选阳性转化子,初步分析其对糠醛的耐受能力,采用荧光定量PCR技术检测MSN2基因及其调控代表基因的转录变化.[结果]构建了在ADH7启动子控制下表达MSN2的酿酒酵母基因工程菌株AM01,该菌株对糠醛耐受能力明显增强,MSN2基因的转录得到了自我精细调控,并提高了其调控基因的转录水平.[结论]以糠醛诱导表达基因的启动子精细调控应激转录调控基因MSN2的转录表达,既可提高酿酒酵母工程菌株对糠醛的耐受能力,又能避免其持续高效表达带来的副作用.

关键词：酿酒酵母、精细调控表达、糠醛、耐受、木质纤维素、燃料乙醇

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资助基金：国家自然科学基金项目No.31570086;四川省科技厅项目No.2014HH0013;四川农业大学人才引进项目No.01426100

在线出版日期：2015-11-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1903-1911