10.13344/j.microbiol.china.140105
基于免疫磁分离的三重荧光定量PCR检测食品中沙门氏菌、志贺氏菌和金黄色葡萄球菌
[目的]开发一种同时对食品中沙门氏菌、志贺氏菌和金黄色葡萄球菌快速、灵敏、准确的检测方法.[方法]利用特异性免疫磁球,在37C条件下从250 mL猪肉增菌液体系中边富集边循环捕获目标菌.快速提取DNA后,利用特异性的引物与探针,对3种食源性致病菌进行三重荧光定量PCR检测.[结果]针对沙门氏菌、志贺氏菌和金黄色葡萄球菌的检测限分别达到2.0、6.8和9.6 CFU/g.方法总体灵敏度、特异性和准确度达到99.2%、100%及99.5%.对151份实际样品进行检测,与国标(GB/T 4789.4-2010、GB 4789.5-2012和GB/T4789.10-2010)方法的检测结果相比,金黄色葡萄球菌有一例阴性偏差.[结论]开发的基于免疫磁分离的三重荧光定量PCR方法,能够在8h内完成对食品中3种致病菌检测,并且灵敏度高、特异性好、检测准确,可以作为快速应对此类食品安全突发事件的检测手段.
免疫磁分离、多重荧光定量PCR、沙门氏菌、志贺氏菌、金黄色葡萄球菌
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北京市科技新星项目No.2008B31
2014-12-25(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
2369-2377