以甘油为底物利用重组大肠杆菌生产聚3-羟基丙酸

摘要：

[目的]解决前期研究中所构建的以甘油为底物合成聚3-羟基丙酸(P3HP)的代谢途径中存在两个主要的问题——细胞内还原力不平衡和质粒丢失,以提高P3HP的产量.[方法]克隆来源于肺炎克雷伯氏菌的1,3-丙二醇(1,3-PDO)氧化还原酶基因,构建P3HP和1,3-PDO联产的菌株,解决细胞内还原力不平衡的问题.利用自杀性载体系统介导的同源重组技术,将甘油脱水酶及其激活因子的基因整合到大肠杆菌基因组中,提高质粒的稳定性.同时,对发酵条件进行优化.[结果]菌种改造和发酵条件优化显著提高了P3HP产量,在摇瓶条件下到达2.7 g/L,比以前的报道提高2倍,并可同时得到2.4 g/L 1,3-PDO.[结论]该重组大肠杆菌合成P3HP的产量得到提高,具有较好的工业化生产前景.

关键词：聚3-羟基丙酸、自杀质粒、同源重组、基因工程、重组大肠杆菌

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资助基金：国家自然科学基金项目No.31200030;中国科学院“百人计划”

在线出版日期：2014-12-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1961-1968