蜜蜂螺原体细胞骨架相关基因mreB的克隆表达及在螺原体二种形态时的表达差异

摘要：

[目的]在大肠杆菌中克隆表达蜜蜂螺原体细胞骨架相关基因mreB1-5,并预测所编码蛋白的理化性质,分析这些基因在螺原体螺旋状和非螺旋状时的表达水平,为进一步分析该基因的功能奠定基础.[方法]通过PCR扩增,从Spiroplasma melliferum CH-1基因组中获得mreB1-5基因,构建的重组表达载体pETmreBl-5分别在大肠杆菌BL21中诱导表达,利用镍亲和树脂纯化重组蛋白,通过在线工具预测MreB蛋白质的理化性质和功能域.利用Real-Time PCR比较螺原体CH-1在两种不同形态时mreB1-5基因的表达量.[结果]成功克隆到5个mreB基因,并在大肠杆菌BL21中高效表达.MreB蛋白分子量分别为36、23、23、37和25 kD,可能均为疏水性的蛋白,属于MreB/Mb1蛋白质家族.荧光定量PCR结果显示,螺原体在非螺旋状时mreB1-5基因的表达水平均远低于在螺旋状时基因的表达水平.[结论]本文第一次克隆表达了螺原体细胞骨架相关基因mreB1-5,初步表明这些基因在螺原体形态方面可能具有重要作用,为后续研究螺原体mre基因在其运动和形态方面的功能提供了重要信息.

关键词：螺原体、细胞骨架、mreB基因、生物信息学、荧光定量PCR

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资助基金：国家自然科学基金项目No.30870002;国家大学生创新创业训练计划No.201310307007

在线出版日期：2014-10-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1771-1778