产异丁醇关键基因在大肠杆菌中表达的研究

摘要：

[目的]改造大肠杆菌缬氨酸合成途径,使其能够代谢合成异丁醇.[方法]将乳酸乳球菌(Lactococcus lactis) 1.2829的2-酮异戊酸脱羧酶基因(kivD)和醇脱氢酶基因(adhA)串联克隆到大肠杆菌DH5α宿主中表达.[结果]经过改造的宿主菌发酵24 h后异丁醇产量为0.12 g/L.酶活测定实验发现,kivD和adhA基因在宿主菌中均得到表达,但由于KivD的低表达量导致宿主菌最终的异丁醇合成能力偏低.通过研究温度和pH对KivD和AdhA酶活的影响,最终选定二者的最适温度为30℃,最适pH为6.5. [结论]通过向宿主菌导入外源异丁醇合成基因能够改造其自身代谢途径,从而合成异丁醇.

关键词：2-酮异戊酸脱羧酶、醇脱氢酶、大肠杆菌DH5α、异丁醇

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资助基金：国家973计划项目2011CB707401;国家863计划项目2012AA021302;天津市滨海新区自主创新重大项目2011-BK120014

在线出版日期：2013-04-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：912-920