esat6基因表达载体的构建及其在戈登链球菌中的表达

摘要：

为了构建结核分枝杆菌(MTb)esat6基因表达载体并在戈登链球菌GP251中进行分泌表达,以结核杆菌H37Rv基因组DNA为模板扩增esat6基因,将esat6基因TA克隆到pMD18-T,构建pMD18-esat6重组载体.酶切消化pMD18-esat6,将esat6基因亚克隆到质粒PSMB104,生成PSMB104-esat6重组载体,用于转化感受态戈登链球菌表达菌株GP251.用Tricine-SDS-PAGE和Western印迹检测esat6蛋白的表达,并用ELISA技术检测该蛋白的分泌表达量.结果表明,酶切、PCR、测序及蛋白表达测定证实esat6基因表达载体构建成功,转化戈登链球菌表达菌株GP251后可分泌表达出相对分子质量约10 kD的esat6蛋白,Western印迹证明蛋白有较好的免疫原性.esat6基因表达载体的成功构建并能在戈登链球菌GP251中进行分泌表达,为研究esat6的免疫原性奠定了一定的基础.

关键词：戈登氏链球菌、黏膜疫苗、esat6基因

所属期刊栏目：36

分类号：R78;R39

资助基金：国家自然科学基金专项基金项目30540051;重庆市科委重大科技攻关项目CSTC,2005AC5061

在线出版日期：2009-05-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：350-354