酿酒酵母adh2和aM6双基因缺失突变株的构建

摘要：

酿酒酵母乙醇合成代谢过程中,阻断或削弱乙醛至乙酸代谢流不但能增强乙醇合成流,同时还能降低发酵乙酸含量.本研究以乙醇脱氢酶Ⅱ(adh2)基因缺陷型酿酒酵母 YS2-Aadh2为出发菌株,应用长侧翼同源两步 PCR(LFH-PCR)策略构建乙醛脱氢酶Ⅵ(ald6)基因敲除组件,转化酿酒酵母YS2-Aadh2敲除ald6基因,之后转入表达质粒pSH65到阳性克隆中,半乳糖诱导表达Cre重组酶切除Kanr基因筛选标记,最后,传代丢失质粒pSH65获得单倍体ald6基因缺失突变株.利用同样的敲除组件和技术再次敲除其等位基因,最终获得双基因缺失突变株 YS2-△adh2-△ald6.发酵实验表明与出发菌株YS2相比,突变株乙酸合成量降低18%,乙醇最高产量提高12.5%.

关键词：酿酒酵母、ald6、adh2、LFH-PCR、基因敲除

所属期刊栏目：36

分类号：S85;S82

资助基金：国家"948"2006-G37;福建省发改委重大项目2004477;福建省科技厅重大项目2005Q007

在线出版日期：2009-04-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：211-216