大肠杆菌表达Trx-rPA融合蛋白的复性纯化

摘要：

大肠杆菌高密度发酵以包涵体形式表达融合蛋白Trx-rPA,表达量22%.包涵体蛋白洗涤后经金属螯合层析纯化,纯度达80%以上.经胱氨酸衍生,以脉冲加样形式复性,复性率可高达30%.经ETI-Sepharose纯化,复性的融合蛋白生物活性可达3.5×105IU/mgPr..融合蛋白可被rEK酶切释放rPA,酶切效率达85%以上.酶切液经IDA-Sepharose和SP-Sepharose层析纯化,rPA纯度达98%以上,生物活性50万IU/mgPr..1L发酵液经分离、复性及纯化后,可得高纯度rPA 300mg以上.

关键词：瑞特普酶、复性、包涵体、融合蛋白

所属期刊栏目：34

分类号：Q782(基因工程（遗传工程）)

在线出版日期：2007-07-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：236-240