肌细胞增强因子2c启动子的克隆与活性鉴定

摘要：

[目的]克隆小鼠肌细胞增强因子2c(Myocyte enhancer factor 2c,Mef2c)的近端启动子,并检测启动子的活性.[方法]提取小鼠畸胎瘤P19细胞基因组DNA,用RT-PCR方法扩增Mef2c近端启动子片段(-1 130/+200),分别构建3个长度不同的Mef2c荧光素酶报告基因载体(约1.3 kb/0.8 kb/0.4 kb),双酶切鉴定所扩增的DNA序列,阳性质粒转染P19细胞,运用Dual-Luciferase(R)Reporter Assay System来检测启动子的活性,初步比较分析启动子片段间的活性差异.[结果]小鼠肌细胞增强因子Mef2c近端的启动子克隆成功,并构建了3段不同长度的启动子荧光素酶报告基因载体,双荧光素酶报告基因实验提示Mef2c近端启动子中的3段不同长度的启动子活性不一致.[结论]成功克隆肌细胞增强因子Mef2c的近端启动子并鉴定了相关活性,为进一步研究各种反式因子对Mef2c近端启动子的转录活性调节奠定了基础.

关键词：肌细胞增强因子、荧光素酶报告基因、基因转录活性、肌细胞增强因子2c启动子

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分类号：R393

资助基金：国家自然科学基金项目31070929;天津市自然科学基金青年项目13JCQNJC09600;武警后勤部项目WJHQ2012-13;天津市心血管重塑与靶器官损伤重点实验室开放基金项目TJC1406;武警后勤学院创新团队科研基金项目WHTD201306

在线出版日期：2015-10-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：681-684