乳酸菌同源重组载体的构建与鉴定
[目的]构建乳酸菌同源重组载体,实现外源基因在乳酸菌中的整合型表达.[方法]根据乳酸菌L.lactis MG1363全基因组中ThyA基因序列设计引物,PCR扩增乳酸菌基因组中ThnyA基因起始密码上游及终止密码下游约1000bp的基因序列,将获得的目的基因依次克隆至载体pMUTIN4中,以琼脂糖凝胶电泳检测目的条带,以双酶切技术、DNA测序予以确证.[结果]琼脂糖凝胶电泳结果显示,目的基因成功扩增,双酶切及DNA测序结果证实,成功构建了同源重组载体pThyA-up-down.[结论]乳酸菌同源重组载体pThyA-up-down为实现外源基因在乳酸菌中的非抗性、整合型表达奠定了基础.
乳酸菌、同源重组、ThyA
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R139.65(劳动卫生)
2011-04-07(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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