RNAi沉默STAT3基因对人宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响

摘要：

[目的]探讨信号转导与激活因子3(signal transducers and activators of transcription 3,STAT3)短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)真核表达载体对宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的作用.[方法]根据siRNA(small inter-ference RNA,siRNA)设计原则,结合pSilerw.er2.1-U6-rleo质粒特点,针对STAT3基因设计并合成两条寡聚DNA片段,退火后克隆入pSilencer2.1-U6-neo质粒,脂质体法将重组质粒转染人宫颈癌HeLa细胞.RT-PCR和Western blotting检测HeLa细胞STAT3基因mRNA和蛋白表达水平;MTT法和流式细胞仪检测细胞的增殖和凋亡.[结果]成功构建了STAT3基因shRNA真核表达载体,转染人宫颈癌HeLa细胞.非特异siRNA组细胞STAT3蛋白、mRNA、细胞增殖率及凋亡率分别为0.55±0.08、0.49±0.05、(4.12±0.45)%和(11.31±1.69)%,而目的siRNA组细胞STAT3蛋白、mRNA、细胞增殖率及凋亡率分别为O.36±0.06、0.32±0.05、 (2.51±0.48)%和(17.39±1.58)%.与非特异siRNA组细胞相比,目的siRNA组细胞STAT3蛋白及mRNA表达下降;同时HeLa细胞增殖能力下降,细胞凋亡率增加.[结论]构建的SYAT3基因shRNA真核表达载体能够通过下调STAT3基因表达,抑制宫颈癌细胞的增殖能力,诱导细胞凋亡.

关键词：宫颈癌、STAT3、RNA干扰、增殖、凋亡

所属期刊栏目：18

分类号：R784(口腔科学)

资助基金：武警医学院博士启动基金项目WBS200816

在线出版日期：2009-05-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：184-187,190