犬骨髓间充质干细胞的分离、培养、纯化及鉴定
[目的]探讨分离、培养、纯化和鉴定犬骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)方法,观察MSCs体外生长特征.[方法]自犬髂后上棘抽取骨髓约10 ml,1.073g/ml的Percoll分离液梯度离心,培养皿培养、换液除去非贴壁细胞,获得MSCs,通过及时、反复传代对MSCs进行纯化和扩增培养,测定生长曲线,并进行形态学观察.流式细胞仪检测扩增后MSCs细胞周期及表面抗原特性.[结果]MSCs在含10%小牛血清的IMEM中生长性状相对稳定,1、3、5代细胞生长曲线基本一致,增殖速度快.流式细胞仪检测表明MSCs强表达干细胞标记CD44,而不表达造血干细胞特异抗原CD34、CD11a、CD14和JLA-DR.第2代(P2)末MSCs周期显示有82.4%的细胞处于GO/G1期.[结论]密度梯度离心结合贴壁培养法能有效分离、纯化和培养犬骨髓MSCs.
骨髓间充质干细胞、分离培养、鉴定、犬
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R329.24(人体形态学)
安徽省自然科学摹金资助课题03043707
2009-04-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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