10.3969/j.issn.2095-414X.2023.05.005
芽孢杆菌BC4铬抗性相关基因chrA的克隆表达
以芽孢杆菌BC4菌株为对象,通过对其铬抗性相关基因chrA的克隆表达来测定其编码蛋白ChrA还原Cr(Ⅵ)的能力以及该蛋白在芽孢杆菌Cr(Ⅵ)去除中的作用,可帮助进一步阐明芽孢杆菌与Cr(Ⅵ)的作用机理,并为芽孢杆菌应用于铬污染治理奠定理论基础.PCR扩增出芽孢杆菌BC4 菌株铬抗性相关基因chrA,PCR产物经克隆与测序,得到chrA完整的DNA序列.该序列大小为1182bp,共编码 393 个氨基酸,预测编码蛋白分子量为 43kDa.根据利用NCBI所进行的BLAST序列比对结果,判断该基因为铬转运蛋白编码基因.将chrA基因PCR产物双酶切后连接到表达载体 pET28b 并转化进大肠杆菌 BL21 中,对其表达产物进行分析.结果表明,chrA基因在大肠杆菌BL21中表达约 43kDa的蛋白,与预期结果相符;重组菌株对Cr(Ⅵ)的耐受能力高于对照菌株,说明ChrA蛋白在芽孢杆菌BC4的Cr(Ⅵ)抗性机制中起重要作用,且重组菌株对Cr(Ⅵ)具备较强的抗性.
芽孢杆菌、chrA基因、基因克隆与表达、重组菌株
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X172(环境生物学)
2023-11-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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