一株高产丝氨酸羟甲基转移酶基因工程菌的构建及发酵产酶条件优化

摘要：

以E.coli AB90054基因组中DNA为模板,采用PCR方法扩增得到glyA基因,将该基因克隆到表达载体pET28a(+)中,转化表达菌株BL21 (DE3)后筛选阳性重组子,并对筛选所得高表达基因工程菌G16进行培养条件和表达条件的优化.结果表明,当培养条件为38℃、pH为7.0、转速为150 r/min时,基因工程菌的生长速度和菌液浓度最佳；当表达条件的诱导温度为30℃、诱导剂浓度为0.5 mmol/L、诱导时间为5h时,基因工程菌诱导目的蛋白表达效果最好.通过SDS-PAGE分析和酶活测定后发现,在优化条件下基因工程菌G16发酵产丝氨酸羟甲基转移酶能力占菌体总蛋白的60％左右,且蛋白活性正常.

关键词：glyA基因、丝氨酸羟甲基转移酶、基因工程、发酵产酶

所属期刊栏目：36

分类号：Q812(生物工程学(生物技术))

在线出版日期：2013-07-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：219-224