可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体重组腺病毒载体的构建及其在肝癌细胞株中的表达

摘要：

背景：肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)能诱导30余种人类肿瘤细胞凋亡．在抗肿瘤治疗中具有广阔应用前景.目的:构建携带可溶性TRAIL基因的复制缺陷型重组腺病毒载体,鉴定其在肝癌细胞株中的表达.方法:以重叠延伸聚合酶链反应(PCR)扩增白细胞介素(IL)-2信号肽和TRAIL膜外区融合片段,克隆于腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV．转化含复制缺陷型腺病毒骨架质粒pAdEasy-1的大肠杆菌pAdBJ5183,经细菌内同源重组产生重组腺病毒Ad-IL-2-TRAIL,以脂质体法转染HEK293细胞包装病毒,感染肝癌细胞株HepG2,荧光显微镜下观察增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的表达.结果:成功构建了携带可溶性TRAIL基因的复制缺陷型重组腺病毒载体.病毒感染HepG2细胞48 h后．超过95％的细胞中出现绿色荧光.结论:所构建的复制缺陷型重组腺病毒Ad-IL-2-TRAIL可在肝癌细胞中高效表达可溶性TRAIL．为进一步行肿瘤TRAIL基因治疗提供了实验依据.

关键词：肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体、自细胞介素2、腺病毒科、复制缺陷、遗传载体

所属期刊栏目：13

分类号：R73;R71

在线出版日期：2008-07-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：276-280