酵母源葡萄糖耐量因子的提取纯化研究

摘要：

为探究葡萄糖耐量因子(GTF)分离纯化工艺,简化纯化步骤,以期得到GTF纯品,本实验在前人氨水提取基础上,采用有机溶剂沉淀除去杂蛋白,在有机溶剂的种类、溶剂的浓度、提取组分以及沉淀时间的确定等方面进行了试验,以有机铬含量(μg)与总蛋白含量(mg)的比值为纯化评价标准,高相液相色谱对纯化结果进行验证,同时将纯化前后的GTF作用于胰岛素抵抗型Hep-G2肝癌细胞,测定细胞葡萄糖消耗量,检测GTF纯化品对细胞葡萄糖代谢的调节活性.最终确定用30％低温乙醇沉淀20 min,10000×g离心取上清液分离纯化GTF,此方法相较于氨水直接提取,有机铬含量与总蛋白含量的比值提高了6倍多,GTF提取率和纯度都得到了显著提高,且纯化后的GTF对胰岛素抵抗型Hep-G2细胞葡萄糖代谢具有显著调节作用(P＜0.01).

关键词：富铬酵母、葡萄糖耐量因子、提取纯化、凝胶层析

所属期刊栏目：28

分类号：Q939.99(微生物学)

资助基金：国家自然科学基金31371763

在线出版日期：2017-01-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1777-1782,1770