白藜芦醇通过调控肝脏生物钟改善CCl4诱导的小鼠肝纤维化

摘要：

[目的]观察白藜芦醇(Res)对四氯化碳(CCl4)诱导的小鼠肝纤维化(HF)的干预作用及其对肝脏生物钟的调节效应.[方法]本实验采用雄性C57BL/6小鼠,将小鼠按体质量随机分成对照组、模型组、白藜芦醇组,每组10只.模型组及白藜芦醇组按2.5 mL/kg腹腔注射体积分数为20％CCl4油剂溶液进行造模,一周两次,连续4周,对照组按同等剂量同等频次给予腹腔注射橄榄油.白藜芦醇以生理盐水稀释呈终浓度为30 mg/kg进行腹腔注射干预,每日1次,连续4周,对照组及模型组给予等量生理盐水按同等频次腹腔注射.4周后处死小鼠并收集血清及肝组织样本.采用病理组织切片苏木精-伊红(HE)染色、马松(Masson)染色、天狼星红(Sirius Red)染色观察肝纤维化情况,全自动生化分析仪测定小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)活性,免疫组织化学检测肝脏α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、I型胶原(COL-1)评估肝纤维化程度,实时聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白质印迹法(Western blot)检测肝脏生物钟基因Clock、脑和肌肉芳香烃受体核转运样蛋白1(Bmal1)、周期基因1(Per1)周期基因2(Per2)、隐花色素1(Cry1)、隐花色素2(Cry2)的表达.[结果]模型组与对照组相比,肝功能指标如ALT、AST、LDH等均显著升高;病理切片HE染色提示模型组汇管区纤维组织增生,肝小叶间胆管明显增生,部分分割包绕肝小叶使其结构紊乱,Masson染色及Sirius Red染色提示模型组汇管区胶原沉积显著增多,免疫组化显示α-SMA、COL-1阳性面积显著增多;RT-PCR及Western blot结果显示肝脏生物钟基因Clock、Bmal1、Per1、Per2、Cry1、Cry2的mRNA及蛋白表达均显著下降.白藜芦醇干预后可显著逆转上述指标变化.[结论]白藜芦醇可显著减轻CCl4诱导的小鼠肝纤维化,及机制可能与调控肝脏生物钟基因有关.

关键词：白藜芦醇、肝纤维化、四氯化碳、生物钟

所属期刊栏目：39

分类号：R285.5(中药学)

资助基金：上海自然科学基金资助项目;虹口区卫生健康委员会中医药科研课题;上海虹口区卫健委临床重点扶持专科建设项目

在线出版日期：2023-01-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1604-1610