10.11656/j.issn.1672-1519.2018.11.14
肿瘤坏死因子-α诱导脂肪细胞胰岛素抵抗模型的建立及评价指标
[目的]确定运用肿瘤坏死因子-α(TNF-α)建立胰岛素抵抗模型的最适时间与剂量,并通过检测TNF-α对葡萄糖转运体4(GLUT4)表达及膜转位的影响探讨模型成立的评价指标.[方法]用不同浓度(5、10、15、20、25 ng/mL)的TNF-α作用于3T3-L1脂肪细胞不同的时间(48、72、96 h),建立胰岛素抵抗模型.另外,分别采用蛋白免疫印迹法(Western blot)和高内涵筛选技术检测模型组细胞GLUT4蛋白表达及分布情况.[结果]与对照组相比,10 ng/mL TNF-α作用3T3-L1脂肪细胞96 h后的模型组的葡萄糖摄取及GLUT4的表达均有显著的降低;加入胰岛素后,对照组的葡萄糖摄取及GLUT4的表达有明显的升高,而模型组无明显变化;胰岛素抵抗模型中,GLUT4膜转位显著降低,差异有统计学意义.[结论]10 ng/mL的TNF-α作用3T3-L1脂肪细胞96 h有利于建立胰岛素抵抗模型.此外,葡萄糖摄取结合GLUT4的蛋白表达及膜转位可作为胰岛素抵抗模型建立的评价标准.
肿瘤坏死因子-α、脂肪细胞、胰岛素抵抗、葡萄糖转运体4、高内涵筛选技术
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R587.1(内分泌腺疾病及代谢病)
国家自然科学基金项目81430095
2018-11-29(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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848-853