新疆野苹果基因组提取优化及模板浓度对ISSR-PCR影响

摘要：

以新疆野苹果干燥叶片为材料,比较分析了CTAB法和4种改良CTAB法提取基因组DNA效果,及ISSR-PCR扩增所需最佳模板浓度.结果表明:5种方法提取的DNA在纯度和量上有很大差别,研磨时加入PVP,可有效去除多酚物质;第一次提取上清液中加入1/10体积CTAB裂解液(0.7 mol/L NaCl、10%CTAB),可以有效去除多糖;异丙醇沉淀时加入1/9体积的乙酸钠,可加速得到白色沉淀.新疆野苹果ISSR扩增体系研究中,发现DNA模板浓度处于400~1000 ng/μL时,ISSR-PCR扩增结果最佳.DNA提取优化及模板浓度优化为后续的分子生物学研究提供理论依据.

关键词：新疆野苹果、DNA提取、模板浓度、优化

所属期刊栏目：24

分类号：Q946-33(植物学)

资助基金：新疆维吾尔自治区财政林业科技专项项目"新疆野苹果种质资源收集与评价"

在线出版日期：2017-05-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：15-18