miR-515-5p靶向ITLN2对子宫内膜基质细胞增殖、迁移和侵袭的影响

摘要：

目的:探讨微小RNA-515-5p（miR-515-5p）是否可靶向内凝集素2（lectin 2，ITLN2）影响子宫内膜异位症（endometriosis，EMT）子宫内膜基质细胞（endometrial stromal cells，ESCs）的增殖、迁移和侵袭。方法:收集2020年12月至2021年12月期间在济宁医学院附属医院生殖医学科就诊治疗的24例EMT患者的在位内膜和异位内膜组织及18例行腹腔镜手术的非EMT患者的正常内膜组织。RT-qPCR检测内膜组织miR-515-5p、
ITLN2 mRNA相对表达量；Western blotting法检测内膜组织中ITLN2蛋白表达量。原代分离、培养EMT患者的ESCs，利用Lipofectamine 2000试剂转染ESCs，并将其分为空白组、miR-515-5p抑制剂组、miR-515-5p抑制剂阴性对照（negative control，NC）组，CCK-8法检测细胞增殖情况；划痕愈合和Transwell实验分别评估细胞迁移、侵袭能力；双荧光素酶报告基因检测miR-515-5p和ITLN2的靶向关系；RT-qPCR技术检测各组细胞miR-515-5p、
ITLN2 mRNA相对表达量；Western blotting技术检测ITLN2、白细胞介素（interleukin，IL）-1β、IL-6及肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）蛋白相对表达量。
结果:EMT患者在位和异位子宫内膜组织miR-515-5p相对表达量显著高于正常子宫内膜组织（均
P<0.001），
ITLN2 mRNA相对表达量显著低于正常子宫内膜组织，异位子宫内膜组织
ITLN2 mRNA相对表达量显著低于在位子宫内膜组织（均
P<0.001），EMT患者异位子宫内膜组织ITLN2蛋白质水平显著低于EMT在位和正常子宫内膜组织（均
P<0.001），EMT患者在位子宫内膜组织ITLN2蛋白质水平显著低于正常子宫内膜组织（
P<0.001）。miR-515-5p抑制剂组细胞存活率［（54.71±2.78）%］、划痕愈合率［（38.31±3.78）%］及侵袭数［（286.67±25.15）个］、miR-515-5p相对表达量、IL-1β、IL-6、TNF-α蛋白相对表达量均显著低于空白组［（100.00±0.00）%，
P<0.001；（84.08±5.14）%，
P<0.001；（515.67±22.19）个，
P<0.001；
P<0.001；
P=0.012；
P=0.010；
P<0.001］，
ITLN2 mRNA和蛋白相对表达量均显著高于空白组（
P<0.001；
P<0.001）。经生物信息学分析和双荧光素酶报告基因检测，
ITLN2为miR-515-5p的潜在靶基因。
结论:降低miR-515-5p水平可抑制EMT患者ESCs增殖、迁移和侵袭，这可能与靶向提高ITLN2表达进而降低炎症因子水平有关。

关键词：子宫内膜异位症、微小RNA-515-5p、内凝集素2、子宫内膜基质细胞、增殖、迁移、侵袭

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资助基金：国家自然科学基金青年基金81701526;济宁市科技局重点研发项目2022YXNS086;National Natural Science Foundation of China for Youth Program81701526;Key R&D Project of Jining Science and Technology Bureau2022YXNS086

在线出版日期：2024-01-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：44-50