miR-143-3p通过调控CX3CL1/CX3CR1信号通路对脂多糖诱导肺泡上皮细胞损伤的影响

摘要：

目的 探讨miR-143-3p通过调控趋化因子(C-X3-C基元)配体1/趋化因子(C-X3-C基元)受体1(CX3CL1/CX3CR1)信号通路对脂多糖(LPS)诱导肺泡上皮细胞损伤的影响.方法 收集急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征(ALI/ARDS)患者及健康体检者外周血血清,标记为ALI/ARDS组和Normal组.双荧光素酶实验证实miR-143-3p与CX3CL1的靶向关系.体外培养人肺泡上皮细胞A549,并将细胞分成Con-trol组、LPS组、LPS+NC mimic组(转染NC mimic)、LPS+miR-143-3p mimic组(转染miR-143-3p mimic)、LPS+miR-143-3p mimic+pcDNA组(共转染miR-143-3p mimic和pcDNA)、LPS+miR-143-3p mimic+pc-CX3CL1组(共转染miR-143-3p mimic和pc-CX3CL1).qRT-PCR检测miR-143-3p和CX3CL1、CX3CR1 mRNA表达水平;Western blot检测CX3CL1、CX3CR1蛋白表达;MTT和流式细胞术检测细胞活力和凋亡;ELISA分析肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、血管内皮生长因子(VEGF)和降钙素原(PCT)水平.结果 与Normal组相比,ALI/ARDS组患者外周血中miR-143-3p表达(0.52±0.05)降低,CX3CL1、CX3CR1的mRNA(1.79±0.08)、(1.65±0.06)和蛋白(1.03±0.15)、(0.98±0.12)表达升高(P<0.05).与Control组比较,LPS组A549细胞中miR-143-3p表达减小,细胞活力降低,凋亡率[(23.56±0.85)％]及TNF-α、IL-1β、IL-6、VEGF、PCT含量增加(P<0.05).miR-143-3p过表达后,细胞活力升高,凋亡率[(13.74±0.69)％]及TNF-α、IL-1β、IL-6、VEGF、PCT含量降低(P<0.05).双荧光素酶实验结果显示,miR-143-3p直接负调控CX3CL1表达.CX3CL1过表达可明显逆转miR-143-3p过表达对LPS诱导的A549细胞损伤的影响和对CX3CR1 mRNA和蛋白表达的抑制作用(P<0.05).结论 miR-143-3p通过抑制CX3CL1/CX3CR1信号通路,减轻LPS诱导的肺泡上皮细胞损伤.

关键词：miR-143-3p、趋化因子(C-X3-C基元)配体1、趋化因子(C-X3-C基元)受体1、脂多糖、肺泡上皮细胞

所属期刊栏目：38

分类号：R563(呼吸系及胸部疾病)

资助基金：宁夏卫生健康委员会科研课题2019-NW-065

在线出版日期：2022-12-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：2649-2656