10.3969/j.issn.1006⁃5725.2022.04.008
呼吸道合胞病毒通过TRAF6/NF⁃κB通路调控人T淋巴细胞白血病细胞增殖
目的 通过呼吸道合胞病毒(RSV)感染人Jurkat细胞(T淋巴细胞白血病细胞),观察Jurkat细胞增殖及凋亡情况,探讨RSV是否对Jurkat细胞具有溶瘤作用及可能机制.方法 将RSV感染Jurkat细胞,设未感染RSV的Jurkat细胞为空白对照组(con),在感染后不同时间点(3、6、12、24、48 h)收集细胞.采用qRT?PCR检测RSV?NS2(呼吸道合胞病毒非结构蛋白2)以了解Jurkat细胞感染RSV情况,MTT、克隆形成实验检测Jurkat细胞的增殖,FCM检测Jurkat细胞的凋亡水平,qRT?PCR检测TRAF6(肿瘤坏死因子受体相关因子6)的表达,Western blot检测Bcl2、TRAF6、NF?κB和cleaved Caspase?3、8、9的表达.结果 RSV感染Jurkat细胞,qRT?PCR检测到Jurkat细胞在感染后3 h内RSV?NS2表达开始出现,6 h明显增高,随时间延长而升高,差异有统计学意义(P<0.05),而TRAF6的表达随感染时间的延长而减少(P<0.05).MTT结果显示RSV感染后6~24 h,Jurkat细胞的增殖能力显著下降(P<0.05),克隆形成实验示RSV感染Jurkat后12 d,Jurkat细胞的克隆数明显减少(P<0.05),提示RSV抑制了Jurkat细胞增殖.FCM结果显示RSV感染后12~48 h后,Jurkat细胞的凋亡水平显著上升,呈时间依赖性(P<0.05).Western blot的结果显示,RSV感染12 h以后,cleaved Caspase?3和cleaved Caspase?9的表达均显著增加,Bcl2的表达明显减少,有时间依赖性(P<0.05),cleaved Caspase?8的表达无明显改变,TRAF6和p?NF?κB的表达随感染时间的延长而降低(P<0.05).结论 降低RSV抑制Jurkat细胞增殖,促进细胞凋亡,通过抑制TRAF6/NF?κB通路发挥对Jurkat细胞的抑制作用,揭示RSV对血液系统肿瘤能产生溶瘤效应.
呼吸道合胞病毒、Jurkat、TRAF6、NF-κB
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R733.7(肿瘤学)
湖北省儿科联盟科学基金资助项目HBPASF?2019?7
2022-04-14(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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