10.3969/j.issn.1006-5725.2018.05.019
二甲双胍通过AMPK通道对界膜中滑膜成纤维细胞的增殖和成骨作用的研究
目的 研究二甲双胍能否通过AMPK通道抑制界膜中的滑膜成纤维细胞(FLSs)的生长并促进其成骨分化.方法 提取原代的FLSs并传4-5代纯化后进行实验,分别加以二甲双胍和促骨生成激动剂(抗坏血酸、β-甘油磷酸、地塞米松)处理.显微镜观察、细胞免疫化学鉴定成纤维细胞;MTT检测药物在不同浓度和时间下对FLSs的生长抑制率;碱性磷酸酶(ALP)和茜素红染色检测药物处理后FLSs随时间变化的ALP活性和成骨情况;Western Blot检测药物作用后通路AMPK及其磷酸化水平情况.结果 光镜可见FLSs长梭形,胞体比较大,也可见少量的多角细胞.角质蛋、白波丝蛋白细胞免疫化学染分别为阴性和阳性.MTT测得并计算出二甲双胍对FLSs增殖的抑制率随着浓度增加而增大.二甲双胍组和促骨生成激动剂组中的ALP和茜素红染色分别出现强阳性结果.结论 二甲双胍能通过激活AMPK通道抑制界膜中FLSs的生长增值并促进其ALP的合成以及细胞外钙结节的沉积,且具有时间和浓度依赖性.
二甲双胍、滑膜成纤维细胞、AMPK、增殖、成骨
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广东省科技计划项目资助编号2014A020212668
2018-05-14(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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