10.3969/j.issn.1006-5725.2017.11.004
Wnt1蛋白对人角膜上皮细胞Cyclin D1蛋白表达的影响及意义
目的:探讨Wnt1蛋白对人角膜上皮细胞Cyclin D1蛋白表达的影响及其相关分子机制.方法:人角膜上皮细胞经复苏、培养,连续传代2次后共培养12个T25细胞培养瓶,4个培养瓶一组,共3组,分别加入25 ng/mL的重组人Wnt1蛋白和50 ng/mL的重组人Wnt1蛋白,一组不加入重组人Wnt1蛋白作为对照,于不同时间点(6、24、48和72 h)各取一个T25培养瓶的细胞,计算各组角膜上皮细胞总数并采用Western blot方法检测角膜上皮细胞中Cyclin D1蛋白的表达情况.结果:对照组Cyclin D1蛋白的表达在0~48 h内随着时间的延长呈现逐步降低的趋势,在48 h达到最低状态,在72 h有所提高.加入Wnt1后6 h,25 ng/mL组未检测到Cyclin D1蛋白表达,50 ng/mL组Cyclin D1蛋白表达有所提高.在24,48和72 h时间点,25 ng/mL组和50 ng/mL组Cyclin D1蛋白表达均提高,48 h达到最高峰,72 h有所回落.添加Wnt1后与对照组比较,25 ng/mL组及50 ng/mL组角膜上皮细胞生长速度均加快,但在6、24及48 h时间点差异无显著性,在72 h差异有显著性.结论:Wnt1蛋白的刺激可在一定时间范围内增强人角膜上皮细胞Cy-clin D1的表达,且与Wnt1蛋白量呈正相关.Cyclin D1的表达强弱,在角膜上皮损伤修复及其细胞增殖分化过程中可能起重要作用.
CyclinD1、人角膜上皮细胞、角膜、Wnt1
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R77;R37
海南省医药卫生科技项目基金资助1341320,37A2010;海南医学院第一附属医院青年培育项目基金资助HYFYPY201603
2017-08-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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