肝细胞生长因子受体的shRNA抑制胶质瘤生长的体内外研究

摘要：

目的:探讨肝细胞生长因子受体(c-metprotooncogene,c-Met)的RNA干涉(RNAi)技术在体内外对U251细胞生长抑制作用.方法:PCR法获得人U6启动子及带有c-Met反向互补靶序列的片段HU6shmet;利用腺病毒载体将其传递至U251细胞;应用MTT法、流式细胞术和Matrigel基质生长实验评价肿瘤细胞转导前后的生物学行为.进一步应用裸鼠皮下荷瘤模型观察腺病毒载体介导shRNA基因治疗对U251细胞生长的抑制作用.对肿瘤组织应用免疫组化的方法进行c-Met和增殖细胞核抗原(PCNA)表达比较.结果:MTT法分析显示rAdUshmet2转导组细胞生长抑制率为70%;与对照组和rAdUsicon转导组比较,细胞周期分析结果表明rAdUshmet2转导组G0 ～ G1期细胞数没有明显变化,进入S期的细胞数较对照组减少了12.6% ～ 12.9%,而进入G2期细胞则增加了10.6% ～ l1.8%.Matrigel基质生长实验显示对照组和rAdUsicon转导组细胞呈正常形态贴壁生长,而rAdUshmet2转导组细胞不能贴壁生长,呈团块状簇集生长.裸鼠皮下荷瘤模型实验显示rAdUshmet2显著抑制皮下肿瘤生长,组织病理学分析显示治疗组c-Met表达下降、PCNA标记指数降低.结论:靶向c-Met的RNAi技术在体内外对U251细胞生长均产生明显抑制作用.因此,shRNA表达腺病毒载体介导的基因治疗可以成为胶质瘤靶向性c-Met治疗的新策略.

关键词：神经胶质瘤、肝细胞生长因子受体、腺病毒、RNA干扰、增殖

所属期刊栏目：26

分类号：R73;R65

资助基金：上海高校选拔培养优秀青年教师科研专项基金07JWYQ03;上海交通大学医学院优秀青年教师基金项目07XYQ01;上海市卫生局青年科研基金项目2008Y066

在线出版日期：2010-04-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共2页

页码：34-35