乌梅总黄酮对MPP+诱导的SH-SY5Y细胞中miR-145-3p/CREB5轴的影响

摘要：

目的 研究乌梅总黄酮(Fructus mume total flavone,FMF)对MPP+诱导人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞基因表达的影响.方法 采用CCK-8 筛选FMF及MPP+作用于SH-SY5Y细胞的最佳浓度与时间.收集对照组、模型组(MPP+诱导)和FMF组(MPP+诱导+FMF干预)SH-SY5Y细胞,进行全基因转录组高通量测序,并筛选差异表达的miRNAs和mRNAs.通过生信软件分析miR-145-3p潜在靶基因,并与差异表达mRNAs相交取交集.将SH-SY5Y细胞分为6 组:对照组、模型组、miR-145-3p mimics组、mimics NC组、miR-145-3p inhibitor组、inhibitor NC组.qRT-PCR检测细胞miR-145-3p表达水平,Western blot检测细胞CREB5 蛋白表达水平,双荧光素酶报告基因实验检测细胞荧光活性.结果 对照组与模型组间比较,存在33 个差异表达miRNAs,模型组与FMF组间比较,存在16 个差异表达miRNAs,取交集后,得到 7 个差异表达的miRNAs,其中miR-145-3p在模型组下调,在FMF组上调.经分析获到 4 个miR-145-3p调控的差异靶基因:CREB5、EGLN1、NTNG1 和SLC22A15.与对照组比较,模型组miR-145-3p表达水平显著降低,CREB5 蛋白表达水平显著升高.与NC组比较,miR-145-3p mimics组miR-145-3p表达水平显著升高,CREB5蛋白表达水平显著降低,miR-145-3p inhibitor组miR-145-3p表达水平显著降低,CREB5 蛋白表达水平显著升高.双荧光素酶报告基因结果显示miR-145-3p与CREB5 存在靶向调控关系.结论 miR-145-3p和CREB5 均在 MPP+诱导的 SH-SY5Y 细胞中差异表达,FMF 可调控 miR-145-3p/CREB5 轴在细胞中的表达水平.

关键词：帕金森病、乌梅总黄酮、转录组测序、miR-145-3p、CREB5

所属期刊栏目：41

分类号：R96(药理学)

资助基金：国家自然科学基金;广西中医药管理局基金项目;广西中医药大学校级课题

在线出版日期：2024-08-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：922-928