10.14066/j.cnki.cn21-1349/r.2020.08.008
HIF-1α和TGF-β1在人胚肺成纤维细胞内的表达及IL-4、 INF-γ对其表达的影响
目的 观察人胚肺成纤维细胞(MRC-5)在LPS刺激前后HIF-1α、TGF-β1的表达情况及对增殖、凋亡、迁移的影响,并通过IL4、INF-γ的干预,分析MRC-5中HIF-1α和TGF-β1的表达变化,从而为COPD患者气道重塑的机制提供理论支持.方法 采用100 μg·L-LPS干预MRC-5,用CCK8、流式细胞仪和Transwell分别检测MRC-5增殖、凋亡及迁移情况,并使用RT-PCR、Westernblot法检测细胞内HIF-1α,TGF-β1的表达情况;同时加入不同浓度IL-4,INF-γ刺激MRC-5,检测不同时间点细胞内HIF-1α和TGF-β1蛋白表达变化.结果 与MRC-5组相比,LPS+ MRC-5组的细胞增殖能力明显增强(P<0.05),处于S期的细胞百分数显著增多(P<0.05),细胞凋亡率明显减少(P<0.05),细胞迁移能力明显提高(P<0.05),同时HIF-1α和TGF-β1的mRNA及蛋白水平均显著升高(P<0.05).而INF-y对MRC-5细胞刺激时间的增加,HIF-1α和TGF-β1表达量同时显著降低;随着INF-y刺激浓度的增加,HIE-1α和TGF-β1MRC-5中表达量同时显著降低;随着IL-4刺激时间的增加,HIF-1α和TGF-β1在MRC-5表达量显著增高;随着IL-4刺激浓度的增加,HIF-1α和TGF-β1在MRC-5中表达量显著增高.结论 在炎症环境下(LPS处理)MRC-5的增殖明显,细胞迁移能力有所提高,细胞凋亡减少,同时,IL-4可明显提高MRC-5中HIF-1α和TGF-β1的表达,INF-γ可降低HIF-1α和TGF-β1的表达,表明IL-4、INF-γ可能通过HIE-1α、TGF-β1影响COPD患者的气道重塑.
人胚肺成纤维细胞、HIF-1α、TGF-β1、IL-4、INF-γ
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R96(药理学)
海南省自然科学基金818MS137
2020-09-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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