人源化抗人TNFα单克隆抗体纯化工艺的优化

摘要：

目的 考察中国仓鼠卵巢细胞(Chinese hamster ovary,CHO细胞)表达的人源化抗人TNFα单克隆抗体的亲和色谱过程中的杂质洗脱工艺,优化目的蛋白洗脱工艺条件.方法 以目的蛋白回收率和宿主细胞蛋白残留量为评价指标,筛选最佳的杂质洗脱缓冲液;利用实验设计方法,以纯度、洗脱峰pH值、宿主细胞蛋白残留量为评价指标,考察目的蛋白洗脱缓冲液的pH值和浓度对工艺的影响,优化目的蛋白洗脱工艺条件.结果 优化后的亲和色谱工艺,在保持目的蛋白高回收率(优化前为86.5％,优化后为86.7％)的同时,可显著降低目的蛋白洗脱峰中宿主细胞蛋白残留量(由1 218×10-6降低至78×10-6),提高目的蛋白纯度(优化前为95.5％,优化后为96.6％),减轻后续纯化压力;提高了目的蛋白洗脱峰的pH值(由3.59提高到4.25),有利于目的蛋白的稳定.结论 优化了人源化抗人TNFα单克隆抗体的亲和色谱工艺,本工艺有效、可行.

关键词：单克隆抗体、TNFα、亲和色谱、工艺优化、纯化

所属期刊栏目：34

分类号：R917(药物基础科学)

在线出版日期：2017-02-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：79-83