基于miR-320/E2F转录因子1轴探讨天南星提取物对肺癌细胞顺铂耐药的影响及相关机制

摘要：

目的 基于miR-320/E2F转录因子1(E2F1)轴探讨天南星提取物对肺癌细胞顺铂耐药的影响及相关机制.方法 本实验时间为2020年9月至2021年6月.取对数期A549/DDP细胞分为空白组和天南星组,空白组置于RPMI 1640培养基中常规培养,天南星组置于加入天南星提取物的RPMI 1640培养基中常规培养.另取对数期A549/DDP细胞,转染miR-320抑制质粒后随机分为转染组、转染联合天南星组,转染组置于RPMI 1640培养基中常规培养,转染联合天南星组置于加入天南星提取物的RPMI 1640培养基中常规培养.培养48 h后进行后续实验.采用qRT-PCR检测不同细胞系及四组miR-320相对表达量,采用MTT法检测四组不同浓度顺铂处理后细胞增殖抑制率,并计算半数抑制浓度(IC50);采用流式细胞术检测细胞凋亡率,采用双荧光素酶实验验证miR-320与E2F1的靶向关系,采用Western blotting法检测E2F1蛋白相对表达量.结果 16HBE细胞系miR-320相对表达量高于A549/DDP细胞系(P<0.001).与空白组比较,天南星组miR-320相对表达量、不同浓度顺铂处理后细胞增殖抑制率、细胞凋亡率升高,IC50、E2F1蛋白相对表达量降低,转染组miR-320相对表达量、不同浓度顺铂处理后细胞增殖抑制率、细胞凋亡率降低,IC50、E2F1蛋白相对表达量升高(P<0.05);与天南星组比较,转染联合天南星组miR-320相对表达量、不同浓度顺铂处理后细胞增殖抑制率、细胞凋亡率降低,IC50、E2F1蛋白相对表达量升高(P<0.05);与转染组比较,转染联合天南星组miR-320相对表达量、不同浓度顺铂处理后细胞增殖抑制率、细胞凋亡率升高,IC50、E2F1蛋白相对表达量降低(P<0.05).双荧光素酶实验结果显示,E2F1是miR-320的一个靶基因,两者结合位点是E2F1的3'-UTR片段.结论 天南星提取物可逆转肺癌细胞顺铂耐药,促进肺癌细胞凋亡,其机制可能与调控miR-320,进而靶向下调E2F1表达有关.

关键词：肺癌、顺铂、天南星提取物、微小RNA-320、E2F转录因子1、药理作用分子作用机制(中药)

所属期刊栏目：30

分类号：R734.2(肿瘤学)

资助基金：辽宁省自然科学基金资助项目20170540559

在线出版日期：2022-08-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：19-23