原代猪肝细胞及主动脉内皮细胞的提取和培养

摘要：

目的 建立有效高活力的原代猪肝细胞和主动脉内皮细胞提取和培养的方法.为异种移植排斥反应的靶细胞——血管内皮细胞和肝细胞的研究提供基础.方法 从野生巴马猪分离肝脏和主动脉血管,通过蠕动泵灌注Ⅱ型胶原酶消化的方法提取猪肝细胞,低速离心和差速贴壁法纯化肝细胞,过碘酸雪夫(PAS)染色、白蛋白与肝细胞核因子4α免疫荧光染色对原代肝细胞进行鉴定;利用Ⅰ型胶原酶血管管腔灌注消化法提取猪主动脉内皮细胞,并通过检测因子Ⅷ相关抗原vWF及内皮细胞吞噬乙酰化低密度脂蛋白的方法进行鉴定.结果 通过本文方法提取到了大量高活力的原代猪肝细胞和主动脉内皮细胞,猪肝细胞可以连续培养一周,内皮细胞可进行传代培养和冻存.两种细胞分别表达肝细胞和内皮细胞标志性蛋白.结论 本研究提供的原代猪内皮细胞和肝细胞提取方法是制备大量高活力的原代内皮细胞及肝细胞的可靠方案.

关键词：猪、原代肝细胞、主动脉内皮细胞、异种移植排斥

所属期刊栏目：6

资助基金：国家"973"计划基金资助项目2015CB554100;国家重点研发计划资助项目2017YFC1103703;国家"863"计划基金资助项目2012AA021005;国家自然科学基金资助项目81300361,81270549,81670593, 81470873,81671838;陕西省自然科学基础研究计划资助项目2017JM8014;陕西省科技统筹创新工程计划资助项目2012KTCL03-01,2011KTCL03-15;西京医院学科助推计划基金资助项目XJZT12M09,XJZT13Z01,XJZT14Z04

在线出版日期：2018-11-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：363-367