10.3969/j.issn.2095-5332.2016.01.006
饱和氢气生理盐水对大鼠肝脏冷缺血/再灌注损伤的影响
目的:探讨饱和氢气生理盐水对大鼠肝脏冷缺血/再灌注损伤(IRI)的保护作用及其机制。方法清洁级雄性SD大鼠24只,周龄为8~10周,体重220~250 g,采用随机数字表法分为3组(n=8):假手术组(Sham组)行开关腹操作,并游离相应血管;肝脏冷缺血/再灌注组(I/R组)于门静脉阻断前5 min经下腔静脉缓慢注射生理盐水(6 ml/kg);饱和氢气生理盐水处理组(HS组)于门静脉阻断前5 min经下腔静脉缓慢注射饱和氢气生理盐水(6 ml/kg)。I/R组与HS组阻断全肝血流后,于肝下下腔静脉开口1 mm作为灌注液流出道,用4℃乳酸林格液经门静脉灌注肝脏。再灌注后6 h后经下腔静脉抽取血样,测定血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)含量,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-10(IL-10)浓度,采用硫代巴比妥酸法测定肝组织丙二醛(MDA)含量,采用黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶(SOD)活性,苏木精-伊红(HE)染色,于光镜下观察肝组织病理学表现,荧光定量PCR检测天冬氨特异性半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)、Bcl-2和Bax mRNA的表达情况。结果与Sham组相比,I/R组和HS组血清中ALT、AST、TNF-α浓度及肝组织MDA含量、caspase-3和Bax/Bcl-2的mRNA水平均升高,I/R组血清IL-10浓度降低,HS组IL-10含量升高,肝组织SOD活性降低〔ALT(U/L):467.3±203.6、275.7±74.0比73.9±30.1,AST (U/L):929.6±442.7、581.4±143.3比194.6±72.2,TNF-α(μg/L):0.0813±0.0298、0.0520±0.0099比0.0273±0.0044,MDA(nmol/mg):1.13±0.10、1.00±0.11比0.84±0.06,caspase-3(2-ΔΔCt):2.77±0.98、1.46±0.33比1.00±0.00,Bax/Bcl-2(2-ΔΔCt):1.59±0.34、1.12±0.16比1.02±0.10,IL-10(μg/L):0.1415±0.0233、0.3206±0.0648比0.2053±0.0497,SOD(U/mg):194.9±20.4、218.1±16.0比240.8±16.9,均P<0.05〕。与I/R组相比,HS组血清ALT、AST、TNF-α浓度及肝组织MDA含量、caspase-3和Bax/Bcl-2的mRNA水平均降低,血清IL-10浓度及肝组织SOD活性升高〔ALT(U/L):275.7±74.0比467.3±203.6,AST(U/L):581.4±143.3比929.6±442.7,TNF-α(μg/L):0.0520±0.0099比0.0813±0.0298,MDA(nmol/mg):1.00±0.11比1.13±0.10,caspase-3(2-ΔΔCt):1.46±0.33比2.77±0.98, Bax/Bcl-2(2-ΔΔCt):1.12±0.16比1.59±0.34,IL-10(μg/L):0.3206±0.0648比0.1415±0.0233,SOD (U/mg):218.1±16.0比194.9±20.4,均P<0.05〕。结论饱和氢气生理盐水可通过其选择性抗氧化、抑制炎症反应及抗凋亡特性减轻大鼠肝脏冷IRI。
氢、缺血/再灌注、肝脏
4
R65;R73
天津市应用基础研究计划面上项目05YFJMJC;天津市卫生行业重点攻关项目13KG105;天津市卫生局科技基金2011KY12
2016-04-25(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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