人瘢痕疙瘩间充质样干细胞向成骨细胞分化过程中Notch信号表达的研究

摘要：

目的 研究人瘢痕疙瘩间充质样干细胞向成骨细胞分化过程中,Notch 1 ～4受体的表达情况,探讨Notch信号通路是否参与调控人瘢痕疙瘩间充质样干细胞的成骨分化.方法 经患者知情同意后,分离培养人瘢痕疙瘩间充质样干细胞,采用流式细胞术检测CD29、CD34、CD44、CD45及CD90的表达;免疫细胞化学法检测Oct 4的表达;体外诱导其向成骨细胞分化,诱导3周后行茜素红染色;于诱导前及诱导后2、3周,采用实时定量-多聚酶链反应(RT-PCR)及免疫蛋白印迹法(westernblot),分别检测细胞Notch 1 ～4受体mRNA及蛋白的表达.结果 流式细胞术结果表明,分离培养的细胞高表达间充质干细胞表型CD29(98.76％)、CD44(98.11％)、CD90(97.86％),不表达造血干细胞表型CD34(0.05％)、CD45(0.03％);免疫细胞化学法检测多能干细胞标志物Oct 4呈阳性表达;向成骨细胞体外诱导3周后,茜素红染色可见明显的钙盐结节.RT-PCR和westem blot结果显示,随着诱导时间的延长,Notch1 ～4受体mRNA和蛋白的相对表达量逐渐减少,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 在人瘢痕疙瘩间充质样干细胞向成骨细胞诱导分化过程中,Notch受体信号的表达逐渐减弱,低水平的Notch信号激活可能有利于瘢痕疙瘩间充质样干细胞的成骨分化.

关键词：瘢痕疙瘩、间充质干细胞、Notch信号通路、成骨分化

所属期刊栏目：28

分类号：R73;R78

资助基金：2012-2016国家临床重点专科基金 国卫办医函[2013]544,国家自然科学基金81660323;贵州省科学技术基金黔科合J字LKZ[2012]31号

在线出版日期：2017-03-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：118-122