超速离心-沉降速率法测定蛋白质分子量的实验条件

摘要：

分子量是蛋白质的重要特征参数,准确测定蛋白质分子量对研究蛋白质结构与功能具有重要意义.该文以牛血清蛋白(BSA)和人血清免疫球蛋白(IgG)为研究对象,采用分析超速离心-沉降速率法(AUC-SV)测定2种蛋白的分子量,并系统研究了样品初始浓度、离心转速、离心时间、离心温度、样品上样体积和缓冲液体系等实验条件对测定结果的影响.结果 表明:离心转速为20 000～40 000 r/min时,影响不明显,样品初始浓度、离心时间、离心温度、缓冲液体系的适宜范围较宽,样品上样体积对测定结果的影响显著.在优化的实验条件下,测得未知蛋白的分子量为39.9 kDa,与质谱法测定结果(40.0 kDa)一致.该方法具有适宜条件范围宽、非破坏性、无需标准品和普适性高等优点,适用于未知蛋白分子量的测定.此外,相关研究结论还可供AUC-SV初学者学习借鉴.

关键词：分析超速离心、沉降速率、蛋白质分子量

所属期刊栏目：37

分类号：O629.73(有机化学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目;华中科技大学实验技术改造项目2019

在线出版日期：2020-08-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：63-67