绿色荧光蛋白的原核表达和纯化及鉴定的实验设计与实践

摘要：

该文以绿色荧光蛋白FRP为实验对象,通过设计原核蛋白表达、镍柱亲和纯化、荧光光谱分析、SDSPAGE电泳分离、Western blotting免疫印迹及蛋白质质谱鉴定等内容的生物化学综合实验,提高学生的生物化学实验技能.荧光光谱分析表明,纯化的GFP蛋白的最大激发波长为480 nm,最大发射波长为500 nm,与已知的GFP荧光光谱基本相同.SDSPAGE电泳分离发现,GFP的亲和纯化效果好,且纯化得到的GFP分子量约为27 kDa,与理论值相符.该实验适用于生物科学专业本科生系统完整地学习蛋白质表达、纯化和鉴定的实验方法,具有很好的综合性,取得非常好的教学效果.

关键词：绿色荧光蛋白、亲和纯化、SDS-PAGE电泳、Western blotting、LC-MS/MS质谱

所属期刊栏目：31

分类号：Q-331(生物科学的研究方法与技术)

资助基金：国家基础科学人才培养基金资助J1103505,J11030632

在线出版日期：2014-10-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：38-41