肝癌组织HNF4αmRNA定量检测方法的建立与初步应用

摘要：

目的 建立一种定量检测肝细胞癌(HCC)组织肝细胞核因子4α(HNF4α)mRNA的方法.方法 取手术获得的HCC组织16例,提取总RNA,逆转录PCR扩增获得全长HNF4αmRNA对应cDNA产物,经TA克隆后,测序确认.根据获得序列,设计检测HNF4αmRNA引物及MGB荧光探针.以体外转录HNF4αmRNA为标准品,建立一步法逆转录荧光定量PCR检测方法,同时设定β-actin mRNA为内参对照,最终计算得到组织HNF4αmRNA水平.采用免疫组化染色检测HNF4α蛋白表达,比较HNF4αmRNA水平与HNF4α蛋白表达的对应结果.结果 HCC组织HNF4αmRNA定量标准曲线斜率为-3.237,相关系数r值达0.994,β-actin mRNA定量标准曲线斜率为-3.037,相关系数r值为0.996,表明建立的方法可用于检测HNF4αmRNA定量(V-4α值),16例HCC组织HNF4αmRNA与HNF4α 蛋白表达结果呈一致性对应关系.结论 我们初步成功建立了定量检测HCC组织HNF4αmRNA水平方法,其意义还需要进一步研究.

关键词：肝细胞癌、肝细胞核因子4α、逆转录荧光定量PCR法

所属期刊栏目：20

分类号：R73;R96

在线出版日期：2017-05-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：302-306