AcSDKP体外抑制脂多糖诱导的小鼠RAW264.7巨噬细胞促炎功能研究

摘要：

目的 探讨N-乙酰-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(AcSDKP)对小鼠RAW264.7巨噬细胞促炎功能的影响.方法 取小鼠RAW264.7巨噬细胞体外培养,分为对照组、脂多糖(LPS)组和LPS加不同浓度的AcSDKP(1 nmol/L、10 nmol/L和100 nmol/L)处理组.采用荧光定量PCR法检测细胞肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞素(IL)-1β、IL-6和诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)mRNA相对水平;使用Transwell小室检测RAW264.7细胞的趋化能力;采用Western blot法检测细胞iNOS、磷酸化的蛋白激酶复合体抑制物(p-IKK)、磷酸化的κB抑制蛋白(p-IκB)和磷酸化的P65(p-P65)蛋白表达水平.结果 LPS处理组TNF-α、IL-1β和IL-6 mRNA水平显著高于对照组[分别高出(41±2.1)倍、(1073±80.8)倍和(1726±110.2)倍,P<0.01];AcSDKP(10 nmol/L和100 nmol/L)处理组TNF-α水平显著低于LPS处理组[分别降低19.0%和39.3%,P<0.01];AcSDKP(1 nmol/L、10 nmol/L和100 nmol/L)处理组IL-1β水平显著低于LPS处理组[分别降低22.08%、35.8%和38.2%,P<0.01];AcSDKP(1 nmol/L、10 nmol/L和100 nmol/L)处理组IL-6水平显著低于LPS处理组[分别降低15.8%、35.7%和43.3%,P<0.01];LPS处理组穿过小室的细胞数为(136±5.3)个/HP,显著高于对照组[(64±5.3)个/HP,P<0.01],而AcSDKP处理组穿过小室的细胞数[分别为(105±4.8)、(85.3±5.0)和(73.7±5.6)个/HP],显著低于LPS组[(136±5.3)个/HP,P<0.05];LPS处理组iNOS mRNA和蛋白表达水平显著高于对照组[分别为(21±2.5)倍和(5.9±0.4)倍,P<0.01],而AcSDKP处理组iNOS mRNA显著低于LPS处理组[分别降低37.8%、23.3%和33.1%,P<0.05];在10 nmol/L和100 nmol/L浓度AcSDKP处理组,两种蛋白水平显著低于LPS处理组[分别降低27.0%和40.2%,P<0.05];LPS处理组p-IKK、p-IκB和p-P65表达量均显著高于对照组[分别为(25.9±4.8)倍、(9.5±0.6)倍和(2.1±0.2)倍,P<0.01],而AcSDKP(10 nmol/L)处理组三者水平较LPS处理组显著下降[分别为42.5%、17.8%和29.7%,P<0.05].结论 AcSDKP可抑制LPS诱导的小鼠RAW264.7巨噬细胞的炎症反应,这一效应可能与阻断IKK/IκB/NF-κB通路有关.

关键词：RAW264.7巨噬细胞、N-乙酰-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸、炎症因子、NF-κB、体外

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分类号：R96;R28

资助基金：国家自然科学基金项目81260081/81170410;上海市卫生系统优秀青年人才培养计划项目XYQ2011010

在线出版日期：2017-04-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：142-147