10.3969/j.issn.1672-5069.2008.02.002
RNAi对HepG2.2.15细胞HBx基因表达和细胞迁徙的影响
目的 探讨HBx基因在肝细胞癌侵袭转移中的作用.方法 利用psiRNA-hH1neo质粒,构建针对HBx 基因的shRNA表达载体psiRNA1、psiRNA2、psiRNA3,并转染HepG2.2.15细胞,用逆转录聚合酶链反应检测shRNA对HBx基因mRNA表达,用免疫印迹法(Western Blot)检测shRNA对HBx蛋白的表达.应用改良Boyden 小室法测定细胞迁移情况.结果 成功构建shRNA表达载体,其中shRNA载体psiRNA1对HBx基因的抑制作用最强,对HBx mRNA抑制率达82.46%,对HBx蛋白的抑制率为65.59%;与空载体转染细胞比较,HepG2.2.15细胞在psiRNA1转染后24 h、72 h迁移率显著下降.结论 HBx基因可能促进HCC的侵袭转移.
肝细胞癌、HepG2.2.15细胞、RNA干扰、肿瘤转移
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R3(基础医学)
2008-06-03(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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