pcDNA3.1-CD81载体在人肝癌细胞中的表达及意义

摘要：

目的研究人白细胞分化抗原CD81真核表达载体pcDNA3.1-CD81在人肝癌细胞系HepG2中的表达及意义.方法由人Molt-4细胞提取细胞总RNA,根据已公布的序列设计引物,运用RT-PCR及PCR方法扩增出人CD81基因,应用TA克隆插入PMD-18T载体;定向克隆入真核表达载体pcDNA 3.1(+);通过脂质体介导转染人肝癌细胞系HepG2,用免疫组织化学方法(ABC法)及流式细胞技术检测目的蛋白的表达.结果由RT-PCR及PCR方法扩增出人CD81编码基因与Genebank公布的序列完全一致.重组真核表达载体pcDNA 3.1-CD81经酶切和PCR鉴定分析正确.免疫组织化学方法(ABC法)及流式细胞技术证明转染的HepG2细胞表面能有效地表达CD81蛋白.结论所构建的pcDNA3.1-CD81真核表达载体在HepG2细胞有良好的表达,该转染细胞可作为研究CD81在HCV感染中的作用提供细胞模型,为研究丙型肝炎病毒(HCV)与CD81相互作用奠定基础.

关键词：CD81、转染、人肝癌细胞

所属期刊栏目：8

分类号：R73;R74

资助基金：国家自然科学基金30070687

在线出版日期：2006-06-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：7-10