HBV特异性核酶与HDV重组体的体外转录及切割活性研究

摘要：

目的利用基因重组技术,用核酶基因置换HDV部分基因,分别用HBV特异性核酶(rRZ)和核酶-HDV重组体(rHDVRZA、rHDVRZB和rHDVRZC)研究体外转录与剪切HBV的活性.方法将含有831bp的HBV C基因片段的质粒pTA-HBV用BamHI消化成线性后,体外转录获取5'端32P标记靶HBV C RNA.将获得的3个核酶-HBV重组体rHDVRZA、rHDVRZB和rHDVRZC克隆于pGEM-T载体T7启动子下游进行非标记的大量转录.分别将rRZ、rHDVRZA、rHD-VRZB和rHDVRZC与32P-HBV C RNA按一定比例和条件保温切割.结果体外实验证明rRZ、rHDVRZA、rHDVRZB和rHD-VRZC在37℃具有酶切活性,提示所设计的核酶-HDV重组体rHDVRZA和rHDVRZB中核酶结构正确.结论在HDV基因组不同位置插入核酶,能够维持酶正确结构的核酶-HDV具有体外特异性切割HBV的活性.

关键词：乙型肝炎病毒、丁型肝炎病毒、核酶

所属期刊栏目：6

分类号：R3(基础医学)

资助基金：广东省自然科学基金

在线出版日期：2006-06-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：193-196