miR-96干扰NKD2表达对骨肉瘤MG63细胞株的增殖、凋亡的影响
目的 探究miR-96通过干扰裸露角质蛋白同源物2(naked cuticle homolog 2,NKD2)的表达对骨肉瘤MG63细胞株的增殖、凋亡的影响.方法 回顾性分析我院2013年9月至2018年2月收集的骨肉瘤标本57例临床资料作为研究组,同时收集距肿瘤边界5 cm的癌旁组织作为对照组,其中男39例,女18例;年龄21~49岁,平均(28.16±6.73)岁.将骨肉瘤MG63细胞株分为miR-96抑制组与空白对照组,其中miR-96抑制组细胞给予miR-96抑制剂转染,空白对照组细胞不作任何处理.培养48h后,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(real time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)法与 Western blot 法检测各组人骨肉瘤 MG63细胞中 miR-96与 NKD2蛋白表达水平;采用四甲基偶氮唑盐(methyl thiazolyltetrazolium assay,MTT)法检测各组细胞增殖情况;采用流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况与细胞周期分布情况.结果 骨肉瘤组织中miR-96表达水平明显高于正常骨组织(P<0.05);骨肉瘤组织中NKD2蛋白表达水平明显低于正常骨组织(P<0.05);miR-96抑制组骨肉瘤细胞中miR-96表达水平明显低于空白对照组(P<0.05);miR-96抑制组骨肉瘤细胞中NKD2表达水平明显高于空白对照组(P<0.05);miR-96抑制组骨肉瘤MG63细胞株经miR-96抑制剂转染48h后细胞相对吸光度明显低于空白对照组细胞(P<0.05);miR-96抑制组骨肉瘤MG63细胞株细胞凋亡率明显大于空白对照组(P<0.05);miR-96抑制组与空白对照组骨肉瘤MG63细胞株细胞周期情况差异明显(P<0.05).结论 miR-96在骨肉瘤组织中呈高表达,NKD2在骨肉瘤组织中呈低表达;miR-96通过抑制NKD2表达而促进骨肉瘤MG63细胞株生长,并抑制骨肉瘤MG63细胞株早期凋亡.
miR-96;裸露角质蛋白同源物2;骨肉瘤;增殖;凋亡
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R738(肿瘤学)
湖北省卫生健康委员会2019-2020年度面上项目;血防专项
2021-08-16(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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