纯化前后C57BL/6小鼠骨髓细胞诱导破骨细胞的方法研究

摘要：

目的 研究纯化前后C57BL/6小鼠骨髓细胞向破骨细胞体外诱导条件,总结利用原代细胞诱导破骨细胞技巧.方法 将纯化前后的原代细胞按不同密度接种(ρ=5×105 cells/cm2及ρ=2.5×105 cells/cm2),并在不同时机加入诱导因子,观察各组中抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP)染色阳性细胞数以及破骨细胞标志性基因的表达水平.结果 未纯化原代骨髓细胞用低密度接种(2.5×105 cells/cm2)时,无法诱导出破骨细胞;加大接种密度(5×105 cells/cm2)后,利用巨噬细胞集落刺激因子(macrophage co[ony-stimulating factor,MCSF)与NF-κB受体激活蛋白配体(receptor activator of NF-κB ligand,RANKL)共刺激可诱导出破骨细胞.纯化后原代细胞用低密度(2.5×105 cells/cm2)接种,利用M-CSF预处理或与RANKL共刺激这两种诱导方法均能诱导出破骨细胞,且预处理法诱导效果更佳.结论 利用原代骨髓细胞诱导破骨细胞,当其中单核细胞比例较低时,应优先考虑加大细胞接种密度,并尽早加入RANKL,促进单核细胞向破骨细胞分化.

关键词：原代骨髓细胞、破骨细胞、体外培养

所属期刊栏目：26

分类号：R329.2(人体形态学)

资助基金：国家自然科学基金81501936

在线出版日期：2020-12-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：802-806